L-aktar suxxettibbli għal fallimenti u soluzzjonijiet HPLC

Bħala strument ta 'preċiżjoni għolja, l-HPLC jista' faċilment iwassal għal xi problemi żgħar idejqek jekk ma jitħaddemx bil-mod korrett waqt l-użu.Waħda mill-aktar problemi komuni hija l-problema tal-kompressjoni tal-kolonna.Kif issolvi malajr il-problemi ta' kromatografu difettuż.Is-sistema HPLC tikkonsisti prinċipalment fi flixkun ta 'ġibjun, pompa, injettur, kolonna, kamra tat-temperatura tal-kolonna, detector u sistema ta' pproċessar tad-dejta.Għas-sistema kollha, il-pilastri, il-pompi u d-ditekters huma l-komponenti ewlenin u l-postijiet ewlenin li huma suxxettibbli għall-problemi.

Iċ-ċavetta għall-pressjoni tal-kolonna hija ż-żona li teħtieġ attenzjoni mill-qrib meta tuża HPLC.L-istabbiltà tal-pressjoni tal-kolonna hija relatata mill-qrib mal-forma tal-quċċata kromatografika, l-effiċjenza tal-kolonna, l-effiċjenza tas-separazzjoni u l-ħin taż-żamma.L-istabbiltà tal-pressjoni tal-kolonna ma tfissirx li l-valur tal-pressjoni huwa stabbli f'valur stabbli, iżda pjuttost li l-firxa tal-varjazzjoni tal-pressjoni hija bejn 345kPa jew 50PSI (li tippermetti l-użu ta 'elużjoni tal-gradjent meta l-pressjoni tal-kolonna tkun stabbli u tinbidel bil-mod).Pressjoni għolja wisq jew baxxa wisq hija problema ta 'pressjoni tal-kolonna.

L-aktar suxxettibbli għal fallimenti u soluzzjonijiet HPLC

1, pressjoni għolja hija l-aktar problema komuni fl-użu ta 'HPLC.Dan ifisser żieda f'daqqa fil-pressjoni.B'mod ġenerali, hemm ir-raġunijiet li ġejjin: (1) B'mod ġenerali, dan huwa dovut għall-imblukkar tal-kanal tal-fluss.F'dan il-punt, għandna neżaminawha biċċa biċċa.a.L-ewwel, aqta 'l-bokka tal-pompa tal-vakwu.F'dan il-punt, it-tubu PEEK kien mimli bil-likwidu sabiex it-tubu PEEK kien iżgħar mill-flixkun tas-solvent biex tara jekk il-likwidu kienx qed iqattar bir-rieda.Jekk il-likwidu ma jkunx qed iqattar jew iqattar bil-mod, ir-ras tal-filtru tas-solvent hija mblukkata.Trattament: Xarrab f'30% aċidu nitriku għal nofs siegħa u laħlaħ b'ilma ultrapur.Jekk il-likwidu jqattar bl-addoċċ, ir-ras tal-filtru tas-solvent hija normali u qed tiġi kkontrollata;b.Iftaħ il-valv Purge sabiex il-fażi mobbli ma tgħaddix mill-kolonna, u jekk il-pressjoni ma titnaqqasx b'mod sinifikanti, ir-ras bajda tal-filtru tiġi mblukkata.Trattament: Whiteheads iffiltrati tneħħew u ivvibrati b'10% isopropanol għal nofs siegħa.Jekk wieħed jassumi li l-pressjoni tinżel taħt 100PSI, ir-ras bajda ffiltrata hija normali u qed tiġi kkontrollata;c.Neħħi t-tarf tal-ħruġ tal-kolonna, jekk il-pressjoni ma tonqosx, il-kolonna tkun imblukkata.Trattament: Jekk ikun imblukkar tal-melħ buffer, laħlaħ 95% sakemm il-pressjoni tkun normali.Jekk l-ostruzzjoni hija kkawżata minn xi materjal aktar ippreservat ħafna, fluss aktar b'saħħtu mill-fażi mobbli preżenti għandu jintuża biex jgħaġġel lejn pressjoni normali.Jekk il-pressjoni tat-tindif fit-tul ma tonqosx skont il-metodu ta 'hawn fuq, id-daħla u l-ħruġ tal-kolonna jistgħu jitqiesu li huma konnessi mal-istrument għall-kuntrarju, u l-kolonna tista' titnaddaf bil-fażi mobbli.F'dan iż-żmien, jekk il-pressjoni tal-kolonna għadha mhix imnaqqsa, il-pjanċa tal-għarbiel tad-daħla tal-kolonna tista 'tiġi sostitwita biss, iżda ladarba l-operazzjoni ma tkunx tajba, huwa faċli li twassal għat-tnaqqis tal-effett tal-kolonna, għalhekk ipprova uża inqas.Għal problemi diffiċli, is-sostituzzjoni tal-kolonna tista 'tiġi kkunsidrata.

(2) Issettjar mhux korrett tar-rata tal-fluss: Ir-rata tal-fluss korretta tista 'tiġi reset.

(3) Proporzjon ta 'fluss mhux korrett: l-indiċi tal-viskożità ta' proporzjonijiet differenti ta 'flussi huwa differenti, u l-pressjoni tas-sistema korrispondenti tal-fluss b'viskożità ogħla hija wkoll akbar.Jekk possibbli, solventi ta 'viskożità aktar baxxa jistgħu jiġu sostitwiti jew issettjati mill-ġdid u ppreparati.

(4) Sistema ta 'pressjoni żero drift: aġġusta ż-żero tas-sensorju tal-livell tal-likwidu.

2, il-pressjoni hija baxxa wisq (1) hija ġeneralment ikkawżata minn tnixxija tas-sistema.X'għandek tagħmel: Sib kull konnessjoni, speċjalment l-interface fiż-żewġt itruf tal-kolonna, u issikka ż-żona tat-tnixxija.Neħħi l-post u issikka jew inforra l-film PTFE bil-forza xierqa.

(2) Il-gass jidħol fil-pompa, iżda l-pressjoni hija ġeneralment instabbli f'dan il-ħin, għolja u baxxa.Aktar serjament, il-pompa mhux se tkun kapaċi tassorbi l-fluwidu.Metodu ta 'trattament: iftaħ il-valv tat-tindif u naddaf b'rata ta' fluss ta '3 ~ 5ml/min.Jekk le, il-bżieżaq tal-arja ġew aspirati fil-valv tal-egżost bl-użu ta 'tubu tal-labra apposta.

(3) L-ebda ħruġ ta 'fażi mobbli: iċċekkja jekk hemmx fażi mobbli fil-flixkun tal-ġibjun, jekk is-sink huwiex mgħaddas fil-fażi mobbli, u jekk il-pompa tkunx qed taħdem.

(4) Il-valv ta 'referenza mhuwiex magħluq: il-valv ta' referenza huwa magħluq wara d-deċelerazzjoni.Normalment jinżel għal 0.1.~ 0.2mL/ min wara li tagħlaq il-valv ta 'referenza.

Sommarju:

F'dan id-dokument, problemi komuni biss fil-kromatografija likwida huma analizzati.Naturalment, fl-applikazzjoni prattika tagħna, se niltaqgħu ma 'aktar problemi oħra.Fl-immaniġġjar tal-ħsarat, għandna nsegwu l-prinċipji li ġejjin: nibdlu biss fattur wieħed kull darba biex tiddetermina r-relazzjoni bejn il-fattur ipotetiku u l-problema;Ġeneralment, meta nissostitwixxu l-partijiet għas-soluzzjoni tal-problemi, għandna nagħtu attenzjoni biex inpoġġu l-partijiet intatti żarmati lura f'posthom biex jipprevjenu l-iskart;Li tifforma vizzju rekord tajjeb hija ċ-ċavetta għas-suċċess tal-immaniġġjar tal-ħsarat.Bħala konklużjoni, meta tuża HPLC, huwa importanti li tingħata attenzjoni għat-trattament minn qabel tal-kampjun u t-tħaddim u l-manutenzjoni xierqa tat-tagħmir.