Antiġeni tal-proteini rikombinanti ħafna drabi jkollhom diversi epitopi differenti, li wħud minnhom huma epitopi ta 'sekwenza u xi wħud huma epitopi strutturali.Antikorpi poliklonali miksuba bl-immunizzazzjoni ta' annimali b'antiġeni żnaturati huma taħlitiet ta' antikorpi speċifiċi għal epitopi individwali u jistgħu jintużaw b'mod ġenerali biex jinstabu strutturi naturali jew proteini fil-mira żnaturati.Benefiċċju sekondarju tal-użu ta 'proteini żnaturati bħala immunoġeni huwa li l-proteini żnaturati għandhom tendenza li jkunu aktar immunoġeniċi u jistgħu jistimulaw rispons immuni qawwi fl-annimali.
Is-sistema ta 'espressjoni ta' Escherichia coli hija ġeneralment magħżula għal skopijiet antiġeniċi minħabba li hija l-aktar sistema għalja f'termini ta 'ħin u flus.Sabiex tittejjeb il-possibbiltà tal-espressjoni tal-proteina fil-mira u l-konvenjenza tal-purifikazzjoni, xi drabi huwa espress framment żgħir biss tal-proteina fil-mira, bħal dominju speċifiku.
L-istruttura tridimensjonali tal-proteini
Id-Dominju Speċifiku Ta Proteina
Jekk l-iskop tal-preparazzjoni tal-antikorpi huwa biss għall-iskoperta tal-wb, huwa ekonomiku u rapidu li jintuża peptide żgħir sintetiku bħala antiġen, iżda hemm riskju ta 'immunoġeniċità dgħajfa jew non-reġeniċità minħabba għażla mhux xierqa tas-segment tal-peptide.Peress li l-preparazzjoni tal-antikorpi teħtieġ perjodu twil, żewġ jew tliet segmenti peptidi differenti ħafna drabi jintgħażlu biex jippreparaw antikorpi bl-użu ta 'antiġenu polipeptidiku biex jiżguraw ir-rata ta' suċċess tal-esperiment.
Il-purità tal-antiġen tal-polypeptide għall-immunizzazzjoni hija meħtieġa li tkun akbar minn 80%.Għalkemm purità ogħla tista 'teoretikament tikseb antikorpi b'ispeċifiċità aħjar, fil-prattika, l-annimali dejjem jipproduċu numru kbir ta' antikorpi mhux speċifiċi, u b'hekk jaħbu l-benefiċċji tal-purità tal-antiġen.
Barra minn hekk, il-preparazzjoni ta 'antikorpi minn peptidi żgħar għandha tkun cross-linked mal-antiġen trasportatur xieraq biex ittejjeb l-immunoġeniċità tiegħu.Żewġ trasportaturi antiġeniċi komuni huma KLH u BSA.
Ħin tal-post: Mar-23-2023